公卫人

 找回密码
 立即注册

QQ登录

只需一步,快速开始

查看: 355|回复: 0
打印 上一主题 下一主题

[经验] PCR 实验室是否产生假性结果,基本出发点在于“压差控制”

[复制链接]
跳转到指定楼层
1#
SICOLAB 发表于 2020-4-29 15:20:52 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式

注册后推荐绑定QQ,之后方才可以使用下方的“用QQ帐号登录”。

您需要 登录 才可以下载或查看,没有帐号?立即注册

x
PCR实验室设计、装修、建设SICOLAB4 b/ X: T% y9 P& L, x
PCR 实验室是否产生假性结果,基本出发点在于“压差控制”,为什么这么说,SICOLAB现简述一下我们的想法观点,欢迎共同交流讨论!) F$ q" b7 a" w# S6 [
众所周知,PCR 实验室的各个实验区域之间应形成单向工艺流、物 流、人流与气流,实现单向流程的屏障保护。通过严格的单向流线,避免实验之间的相互干扰和交叉污染,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染,产生假性结果。- ]2 S. k$ ~- q. W2 w' D/ l
一、基本了解
。 N0 D' [% m9 {1、四个过程5 p! m8 k2 W* ?7 k4 u! G7 E
(在这里面的医学检验、病理、分子生物等专业的人都基本了解,SICOALB就不多重复了,简单说一下)PCR 实验室又叫基因扩增实验室,是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称,用于放大特定的 DNA 片 段,可看作生物体外的特殊 DNA 复制。完成一组 PCR 实验,通常需经过试剂准备、样品制备、核酸扩增和产物分析 4 个过程。
, E! H, _2 ?# L) s% l6 ?2、单一流向5 x' ^+ w7 j6 ]& \. @
为避免交叉污染,进入各个区域的工作流程须严格遵循单一方向进行,按照清洁-半污染-污染的顺序排列,各区内的试剂和耗材不能再进入任何“上游”区域。也就是(试剂准备区-样品制备区-核酸扩增区-产物分析区)。
3 r3 R' C* N/ Z  L+ Q其中,试剂准备区、样品制备区为扩增前区,核酸扩增区、产物分析区为扩增后区。扩增前区与扩增后区应严格分开,必须使用不同的房间,两区之间设置一定的隔离。如使用全自动分析仪,核酸扩增区、产物分析区可合并为扩增产物分析区。
; o) J5 J& m1 H+ L7 w4 N; a- I三、PCR实验室的布局形式: B' V8 ?- B' n7 ~! l1 i
一是分散形式,二是组合形式。! ]& }+ m; t7 a9 m- i) i7 m9 z
1、分散形式是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远,分散布置。对于这种布置方式的 PCR 实验室,由于各个实验之间不易相互干扰,因此无特殊要求。7 l8 C8 O4 o) z2 y4 s
2、组合形式是指完成 PCR 4 个实验过程的实验用房彼此相邻、集中布置,形成一块完整、独立的实验区域。由于各个实验用房集中布置,容易造成相互干扰,因此,对总体布局以及屏障系统具有严格的要求。
- Z# A; Y1 p* ~. p0 D+ p四、PCR实验室的压差控制是避免污染核心
4 `, v。 @7 y! \9 o5 k1、压差的控制主要分为两种:一是不带缓冲间,二是带缓冲间。
6 f0 m! U0 i$ e8 g4 z不带缓冲间:由于场地限制及投资限制,一些新建 PCR 实验室仅由专用走廊与 4 个实验区组成,每个实验区无专用的缓冲间。4 个实验区共用 1 个专用走廊,工作流线由左向右。. a" v. n6 B+ |! ^- V, e
实验时,人流与物流分离,工作人员通过专用走廊进出各实验区,试剂和样品通过带联锁装置的传递窗进行传递,保证试剂和样品在传递过程中不受污染。$ i# J8 e! q+ I. n, t; d
. T, P9 U- J  A, Y
带缓冲间:在场地和投资均允许的情况下,PCR 实验室较为理想的布置方式,是每个实验区均带一个专门的缓冲间。带缓冲间的PCR实验室又可分为四个区皆带缓冲间,也可分为只有一个“产物分析区”不带缓冲间的。5 d( w" ~' J, j6 y

- G6 o: _" `; U9 Z) G
6 x( W. U6 K8 [/ D" b$ y  B3、常见PCR实验室压差设计
5 @* G. y. I1 [3 y% ~% c9 s        PCR 实验室的各个实验区域之间应形成单向流程的屏障保护,环境压力从试剂准备区到产物分析区,逐渐递减。 % P& U; k6 A$ f# E* B" Z3 f# ~
1)试剂准备区是工艺流线的开始,设计为正压或常压,避免外界环境的污染。
0 }; J: I' o' K( Q- k8 }2)样品制备区一般为常压或负压,大多数情况下设计成二级生物安全实验室,避免实验产物溢出,污染外界环境。 3 R5 ^$ `$ R3 L2 U  v8 ~5 R
2)核酸扩增区为负压,避免实验产物溢出,污染外界环境。  P: ^3 n; n$ d; x2 U
3)产物分析区是最主要的扩增产物污染来源,通常压力设计为最低,避免实验产物溢出,污染外界环境。% K' M4 u  z+ r# p( l$ I) I1 p
4)以上为SICOLAB整理,实验室整体设计建设工程、生物样本建设工程、GMP环境建设工程、环保工程。
您需要登录后才可以回帖 登录 | 立即注册

本版积分规则

会员|至尊||公卫人 ( )

GMT+8, 2020-7-10 19:43 , Processed in 0。126019 second(s), 15 queries , Gzip On, MemCached On。

Powered by X3.4

Copyright © 2001-2020, Tencent Cloud.

快速回复 返回顶部 返回列表
GLG彩票计划群 吉利彩票计划群 富贵彩票计划群 256彩票计划群 众彩票计划群 极速赛车登陆 福布斯彩票计划群 彩盈彩票计划群 河北11选5 山东11选5走势